• <nav id="asgkk"><strong id="asgkk"></strong></nav>
  • <menu id="asgkk"><tt id="asgkk"></tt></menu>
  • <nav id="asgkk"><code id="asgkk"></code></nav>
  • <xmp id="asgkk"><nav id="asgkk"></nav>
  • 上海撫生實業有限公司
    中級會員 | 第11年

    18201748966

    當前位置:首頁   >>   資料下載   >>   鐵-過氧化物岐化酶檢測試劑盒說明書

    ELISA檢測試劑盒
    菌株
    細胞株
    人系統細胞株
    動物細胞株
    標準品、對照品
    生物科研抗體
    生化試劑
    PCR試劑
    標準品
    培養基
    分析標準品
    進口試劑盒
    鑒定試劑盒
    生化檢測試劑盒
    細胞
    分子生物學試劑
    微生物菌種
    PCR試劑盒

    鐵-過氧化物岐化酶檢測試劑盒說明書

    時間:2022-3-18閱讀:938
    • 提供商

      上海撫生實業有限公司
    • 資料大小

      35.7KB
    • 資料圖片

    • 下載次數

      50次
    • 資料類型

      WORD 文檔
    • 瀏覽次數

      938次
    點擊免費下載該資料

    鐵-過氧化物岐化酶檢測試劑盒說明書

    實驗原理:

    本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中血清素/血清胺(ST)水平。用純化的血清素/血清胺(ST)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入血清素/血清胺(ST),再與HRP標記的血清素/血清胺(ST)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血清素/血清胺(ST)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中血清素/血清胺(ST)濃度。

    試劑盒性能:

    1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。

    2. 特異性:不與其它細胞因子反應。

    3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%。

    標本要求:

    1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融

    2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

    樣本處理及要求:

    1.血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

    2.  血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

    3.  組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。

    4.  細胞培養物上清或其它生物標本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

    試劑盒組成 :

    1 30倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶 7 終止液 6ml×1瓶

    2 酶標試劑 6ml×1瓶 8 標準品(160pg/ml) 0.5ml×1瓶

    3 酶標包被板 12孔×8條 9 標準品稀釋液 1.5ml×1瓶

    4 樣品稀釋液 6ml×1瓶 10 說明書 1份

    5 顯色劑A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2張  

    6 顯色劑B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1個

    操作步驟:

    1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

     標準品稀釋.png

    2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

    3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   

    4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

    5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

    6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

    7.溫育:操作同3。

    8.洗滌:操作同5。

    9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.

    10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

    11.測定:以空白孔調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

    計算:

      以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。

    注意事項:

    1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

    2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

    3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。

    4.請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

    5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

    6.底物請避光保存。

    7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

    8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

    9.本試劑不同批號組分不得混用。

     保存條件及有效期:

    1.試劑盒保存:;2-8℃。

    2.有效期:6個月

     

     


    在線詢價

    X

    已經是會員?點擊這里 [登錄] 直接獲取聯系方式

    會員登錄

    X

    請輸入賬號

    請輸入密碼

    =

    請輸驗證碼

    收藏該商鋪

    X
    該信息已收藏!
    標簽:
    保存成功

    (空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

    常用:

    提示

    X
    您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
    撥打電話
    在線留言
    美国一级毛片片aa变态 - 视频 - 在线观看 - 影视资讯 - 小雨网